對于有微生物檢驗要求的醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)，尤其是高風(fēng)險醫(yī)療器械（包括無菌醫(yī)療器械、植入性醫(yī)療器械）生產(chǎn)企業(yè)而言，微生物學(xué)檢驗是其產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)判斷中的重要指標(biāo)。
開展醫(yī)療器械GMP檢查，有助于及時發(fā)現(xiàn)醫(yī)療器械生產(chǎn)過程中的合規(guī)性問題，降低后續(xù)風(fēng)險。借鑒藥品GMP的成功經(jīng)驗，醫(yī)療器械GMP在無菌室、微生物限度實(shí)驗室、陽性對照室的設(shè)置和布局要求，檢驗標(biāo)準(zhǔn)方面大量引用了藥品GMP的指導(dǎo)理念。
01、微生物檢驗實(shí)驗室組成及功能
對高風(fēng)險醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)來說，需進(jìn)行微生物檢驗的情況包括以下四種：廠房或檢驗室有潔凈度要求；生產(chǎn)工藝中使用純化水或注射用水；在非無菌產(chǎn)品出廠前對其初始污染菌控制水平有要求；無菌產(chǎn)品出廠前需進(jìn)行無菌檢驗。
生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)根據(jù)不同檢查對象，選擇適宜且符合標(biāo)準(zhǔn)的檢測方法及相應(yīng)判定指標(biāo)。
典型的微生物檢驗實(shí)驗室由無菌室、微生物限度室及陽性對照室三部分組成，三部分各有分工。
無菌室
無菌室是用來檢驗無菌醫(yī)療器械及其原料、輔料是否無菌的場所。檢驗供試品是否被細(xì)菌和真菌污染，須在環(huán)境潔凈度萬級以下、局部潔凈度百級的單向?qū)恿骺諝鈪^(qū)域內(nèi)或隔離系統(tǒng)中進(jìn)行，檢驗全過程須嚴(yán)格遵循無菌操作要求，防止微生物污染。
微生物限度室
微生物限度室被用于終端滅菌醫(yī)療器械滅菌前的初始污染菌、產(chǎn)品初包裝的初始污染菌、潔凈區(qū)環(huán)境和工藝用水的微生物檢測，以及無菌過濾器的驗證、環(huán)境及設(shè)備消毒效果的驗證、滅菌效果的驗證等。
陽性對照室
陽性對照室被用于無菌試驗所需的陽性對照菌種及菌懸液的制備，培養(yǎng)基的適用性檢查，以及方法適用性試驗所需的標(biāo)準(zhǔn)菌懸液的制備。陽性對照室中的操作多為有菌操作，對操作人員及操作環(huán)境造成污染的可能性大。因此，陽性對照室必須具有獨(dú)立的空調(diào)系統(tǒng)，且應(yīng)達(dá)到環(huán)境潔凈度萬級以下、局部潔凈度百級的要求，室內(nèi)空氣經(jīng)空氣過濾裝置處理后直接排向室外。
02、微生物檢驗中的常見不符合項
筆者通過匯總2015~2018年自身參與及各地藥監(jiān)部門公開的對60余家高風(fēng)險醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)的GMP檢查結(jié)果，調(diào)取其中與微生物檢驗有關(guān)的不符合項，并依據(jù)國家藥品監(jiān)督管理部門發(fā)布的指導(dǎo)原則及部分法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)，對不符合項按特征類型進(jìn)行歸類，總結(jié)出人員、潔凈區(qū)壓差、文件記錄、設(shè)施設(shè)備、計量校驗、初始污染菌控制、法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)符合性及物料標(biāo)識8個方面的共性缺陷項類型。
人員方面
相關(guān)質(zhì)檢人員未定期接受衛(wèi)生和微生物學(xué)基礎(chǔ)知識、潔凈作業(yè)相關(guān)培訓(xùn)。
新入職的檢驗員在未接受與其崗位要求相適應(yīng)培訓(xùn)的情況下即上崗。
培訓(xùn)記錄表中缺少培訓(xùn)具體內(nèi)容和考核評價方法。
檢驗室高壓蒸汽滅菌器操作人員無操作資格證書和相關(guān)培訓(xùn)記錄。
專職檢驗員不具備所從事的微生物檢驗的專業(yè)知識背景，在接受現(xiàn)場提問時無法完整回答微生物檢驗項目相關(guān)規(guī)定的內(nèi)容。
相關(guān)人員未定期接受體檢，或健康證已過期。
潔凈區(qū)壓差方面
在微生物限度室、陽性對照室與更衣室之間，更衣室與更鞋室之間，更鞋室與外界非潔凈區(qū)之間無指示壓差的裝置。
陽性對照室與緩沖走廊之間的壓差顯示為正壓。
無菌室與室外大氣的靜壓差小于10帕。
壓差表損壞，開關(guān)門無反應(yīng)。
文件記錄方面
未建立設(shè)備操作規(guī)程，操作規(guī)程未受控，現(xiàn)場存有已作廢文件。
未建立設(shè)備維護(hù)保養(yǎng)制度或規(guī)程，無相關(guān)維護(hù)保養(yǎng)記錄。
記錄簽名不全，相關(guān)記錄上無手寫簽名。
檢驗記錄造假。
記錄中信息缺失，無法滿足可追溯要求。
未提供原始檢驗記錄。
記錄中所描述的過程參數(shù)與文件規(guī)定不一致。
未制定對菌種傳代、使用和保存的管理規(guī)定，未見菌種的傳代、使用和銷毀記錄。
微生物檢驗用培養(yǎng)基無驗收標(biāo)準(zhǔn)及驗收記錄。
未進(jìn)行清場，未能提供清場記錄。
設(shè)施設(shè)備方面
設(shè)施不足，如，未設(shè)置陽性對照室。
設(shè)備不足，如，微生物限度室中未設(shè)置對純化水進(jìn)行微生物限度檢測用的薄膜過濾設(shè)備。
未在潔凈區(qū)開展微生物檢驗。
檢驗設(shè)備未設(shè)置在檢驗場所內(nèi)。
檢驗場所環(huán)境條件不符合要求。
空氣凈化系統(tǒng)安裝位置不合理，不便于開展日常監(jiān)測及維護(hù)保養(yǎng)。
計量校驗方面
未對檢驗設(shè)備實(shí)施校準(zhǔn)或檢定。
校準(zhǔn)或檢定證書不在有效期內(nèi)。
初始污染菌控制方面
未根據(jù)產(chǎn)品質(zhì)量要求對產(chǎn)品的初始污染菌控制進(jìn)行規(guī)定。
未根據(jù)控制文件要求對產(chǎn)品的初始污染菌進(jìn)行檢測。
未對初始污染菌檢測記錄進(jìn)行匯總和趨勢分析。
未對初包裝材料的初始污染菌檢驗作出規(guī)定并提供檢測記錄。
法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)符合性方面
檢測依據(jù)顯示為《中國藥典》2010版，而非現(xiàn)行、有效的《中國藥典》2015版。
文件規(guī)定中引用的標(biāo)準(zhǔn)與實(shí)際操作時遵循的標(biāo)準(zhǔn)不一致。
物料標(biāo)識方面
未對暫存物料的冰箱進(jìn)行有效的物料標(biāo)識管理，無法識別部分物料的名稱、配制狀態(tài)、檢驗狀態(tài)；未對陽性菌種標(biāo)明傳代次數(shù)。
檢驗用試劑的信息標(biāo)識不全，如，未對理化實(shí)驗室中的部分化學(xué)試劑標(biāo)識其品名、濃度、配制時間等。
經(jīng)過進(jìn)一步統(tǒng)計可發(fā)現(xiàn)，微生物檢驗方面的常見共性缺陷項共36個。其中，文件記錄、人員、設(shè)施設(shè)備方面的共性缺陷在所有缺陷項中占比最高，分別約占27.8%、16.7%、16.7%。8個缺陷項類型的數(shù)量及所占比例情況按由高到低排列如表1所示。
通過以上分析可看出，微生物檢驗的常見共性缺陷項分布較廣，涵蓋人員、設(shè)備、物料、法規(guī)等各方面。這也反映出，大部分生產(chǎn)企業(yè)中的相關(guān)從業(yè)人員對近年來發(fā)布的相關(guān)配套指導(dǎo)原則、指南及行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，在理解和實(shí)施上存在不足，與應(yīng)達(dá)到的標(biāo)準(zhǔn)相比存在較大差距。
醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)（尤其是無菌醫(yī)療器械、植入性醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)）對如何按法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定、合規(guī)地開展微生物檢驗，了解有待深入，在微生物檢驗實(shí)驗室設(shè)計、檢驗人員培訓(xùn)、檢驗記錄的準(zhǔn)備等方面存在不足，有必要接受相關(guān)專項培訓(xùn)并進(jìn)行整改。
03
微生物檢驗現(xiàn)場檢查要點(diǎn)
監(jiān)管人員在進(jìn)行現(xiàn)場檢查時應(yīng)熟知每種檢驗的具體要求，重點(diǎn)檢查培養(yǎng)基種類，主要檢驗儀器，試劑的配制，以及對照試驗、培養(yǎng)基適用性等。
筆者針對上述常見共性缺陷項，結(jié)合自身在醫(yī)療器械行業(yè)中的從業(yè)及監(jiān)管經(jīng)驗，就醫(yī)療器械GMP現(xiàn)場檢查中的微生物檢驗歸納出12條檢查要點(diǎn)（見表2），力求較全面地涵蓋現(xiàn)場檢查中監(jiān)管人員應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注的內(nèi)容，并為企業(yè)開展自查自糾提供切入點(diǎn)。
