提示

2019-nCoV RNA檢測(cè)結(jié)果用于2019-nCoV RNA的推定鑒定。陽性結(jié)果表明2019-nCoV的感染陽性，但不排除細(xì)菌感染或與其他病毒合并感染。被檢測(cè)到的病原體可能不是疾病的確切原因。陰性結(jié)果也不排除2019-nCoV感染，不應(yīng)作為治療或其他患者管理決策的唯一依據(jù)。陰性結(jié)果必須與臨床觀察、患者病史和流行病學(xué)信息相結(jié)合。

2020年2月6日：美國疾病控制與預(yù)防中心(CDC)研發(fā)的檢測(cè)2019新型冠狀病毒（2019- ncov）的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)試劑盒已于昨天開始運(yùn)送到各CDC實(shí)驗(yàn)室。

該試劑盒被命名為CDC 2019-nCoV實(shí)時(shí)RT-PCR診斷面板（CDC 2019-nCoV Real Time RT-PCR），配合現(xiàn)有的RT-PCR檢測(cè)儀器，用于檢測(cè)季節(jié)性流感。該試劑盒可以在4小時(shí)內(nèi)提供檢測(cè)結(jié)果。

該試劑盒尚未通過美國FDA的審批或批準(zhǔn)，但是試劑盒的分發(fā)和使用符合FDA于2020年2月4日發(fā)布緊急授權(quán)（EUA）要求。試劑盒是通過CDC建立的國際試劑資源（IRR）運(yùn)送的，該機(jī)構(gòu)可在美國國內(nèi)和全球范圍內(nèi)分發(fā)實(shí)驗(yàn)室試劑。

最初，將向美國國內(nèi)實(shí)驗(yàn)室分發(fā)大約200個(gè)試劑盒，并向選定的國際實(shí)驗(yàn)室分發(fā)數(shù)量相當(dāng)?shù)脑噭┖小?/span>每個(gè)試劑盒可檢測(cè)約700至800例患者樣本。今后還將生產(chǎn)更多的試劑盒，并可向IRR供應(yīng)。

IRR正在從合格的實(shí)驗(yàn)室接受2019-nCoV試劑盒的訂單。這包括115個(gè)合格的美國實(shí)驗(yàn)室，如州和地方公共衛(wèi)生實(shí)驗(yàn)室和國防部(DoD)實(shí)驗(yàn)室，以及191個(gè)合格的國際實(shí)驗(yàn)室，如世界衛(wèi)生組織（WHO）全球流感監(jiān)測(cè)和響應(yīng)體系（Global Influenza Surveillance Response System，GISRS）實(shí)驗(yàn)室。

2019-nCoV實(shí)時(shí)RT-PCR診斷面板使用說明及風(fēng)險(xiǎn)提示

CDC的2019-nCoV實(shí)時(shí)逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（real-time Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction，rRT-PCR）診斷面板是一種實(shí)時(shí)RT-PCR檢測(cè)，用于針對(duì)從符合CDC 2019-nCoV檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的個(gè)人身上收集上、下呼吸道樣本（如鼻咽或口咽拭子、痰、下呼吸道吸引物、支氣管肺泡灌洗、鼻咽沖洗/吸引物或鼻吸引物）中的核酸進(jìn)行所推定的定性檢測(cè)（presumptive qualitative detection）。

這種檢測(cè)僅限于美國CDC指定的并根據(jù)1988年臨床實(shí)驗(yàn)室促進(jìn)法案修正案（CLIA）認(rèn)證的，可進(jìn)行高復(fù)雜性檢測(cè)的合格實(shí)驗(yàn)室。

可熟練進(jìn)行實(shí)時(shí)RT-PCR檢測(cè)的訓(xùn)練有素的實(shí)驗(yàn)室人員可使用CDC 2019-nCoV實(shí)時(shí)RT-PCR診斷面板進(jìn)行檢測(cè)。新型冠狀病毒(2019-nCoV)實(shí)時(shí)RT-PCR診斷面板僅在FDA的緊急授權(quán)下使用。

RT-PCR診斷面板摘要

CDC 2019-nCoV實(shí)時(shí)RT-PCR診斷面板是一種基于廣泛應(yīng)用的核酸擴(kuò)增技術(shù)，輔助2019-nCoV檢測(cè)和診斷的分子體外診斷試驗(yàn)。該產(chǎn)品含有寡核苷酸引物（oligonucleotide primers）和雙標(biāo)記水解探針（TaqMan?），以及在rRT-PCR中用于呼吸道樣本的2019-nCoV RNA體外定性檢測(cè)的對(duì)照材料。

檢測(cè)程序原則

用于檢測(cè)2019-nCoV的寡核苷酸引物和探針均選自病毒核衣殼(N)基因區(qū)域。該面板設(shè)計(jì)用于SARS樣冠狀病毒的通用檢測(cè)(N3，一個(gè)引物/探針組)以及2019-nCoV的特異性檢測(cè)(N1和N2，兩個(gè)引物/探針組)。該面板還包括用于檢測(cè)對(duì)照品和臨床樣本中人體核糖核酸酶P（RNase P，RP)的附加引物/探針。

從上呼吸道和下呼吸道標(biāo)本中分離純化的RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，在美國應(yīng)用生物系統(tǒng)公司(Applied Biosystems)7500 Fast Dx 實(shí)時(shí)PCR儀中擴(kuò)增，軟件為SDS version 1.4。在PCR退火時(shí)，探針結(jié)合到位于正向和反向引物之間的特定目標(biāo)序列。在PCR周期的延伸階段，Taq酶利用其5′-3外切酶活性水解切斷探針，導(dǎo)致報(bào)告熒光基團(tuán)與淬滅熒光基團(tuán)分離，從而產(chǎn)生熒光信號(hào)。在每個(gè)周期中，更多的報(bào)告熒光基團(tuán)從各自的探針中分裂出來，增加了熒光強(qiáng)度。在每個(gè)PCR周期中，使用Applied Biosystems的7500 Fast Dx Real-Time PCR系統(tǒng)SDS version 1.4軟件監(jiān)測(cè)熒光強(qiáng)度。

病毒RNA的檢測(cè)不僅有助于疾病的診斷，而且提供流行病學(xué)和檢測(cè)信息。

準(zhǔn)備和檢測(cè)過程摘要

（Summary of Preparation and Testing Process）

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診斷面板結(jié)果說明

（摘自2019-nCoV rRT-PCR Diagnostic Panel Results Interpretation Guide）

下表中列出2019-nCoV rRT-PCR診斷面板的預(yù)期結(jié)果。如果得到的結(jié)果不符合這些指南，請(qǐng)重新提取和重新檢測(cè)樣本。如果重復(fù)檢測(cè)產(chǎn)生相似的結(jié)果，聯(lián)系CDC咨詢并移交可疑樣本（possible specimen referral）。請(qǐng)參閱2019-nCoV rRT-PCR診斷面板使用說明第8頁和第31頁以獲得移交和聯(lián)系信息（referral and contact information）。

文章來源：

https://www.cdc.gov/media/releases/2020/p0206-coronavirus-diagnostic-test-kits.html

https://www.fda.gov/media/134922/download